Publication: Influencia de los reguladores del crecimiento vegetal en la producción de biomasa in vitro y la biosíntesis de alcaloides citotóxicos de Amaryllidaceae en Caliphuria tenera Baker.
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Date
2023-03-23
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Publisher
ScienceDirect
Abstract
Se sabe que los módulos de unión a carbohidratos (CBM) tienen el potencial de aumentar la unión de las enzimas activas en carbohidratos a los polisacáridos objetivo, por lo que el módulo catalítico puede entrar fácilmente en contacto con el sustrato a través del CBM. La lacasa es una de las enzimas más importantes que se utilizan en la etapa de deslignificación en la industria papelera. Esta enzima mejora la calidad del producto, el proceso industrial y las tecnologías respetuosas con el medio ambiente. En este estudio, hemos construido el gen de fusión que codifica un nuevo CBM36 a partir de la β-xilosa B (GbtXyl43B) de Geobacillus thermoleovorans IT- 08 y la lacasa (LCC2) de Pleurotus salmoneostramineus utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) superpuesta, y la hemos insertado en los vectores de expresión pET-32a y pYHM1 para Escherichia coli BL21 codón plus y Saccharomyces cerevisiae BJ1824, respectivamente. La proteína de fusión, Cbm36-Lcc2, se expresó con éxito tanto en E. coli como en S. cerevisiae, y se determinó que el pH y la temperatura óptimos eran 5,0 y 60 ◦C, y 6,0 y 60 ◦C, respectivamente, con 2,2′-azino-bis (3- etilbenzotiazolina-6-sulfonato; ABTS) como sustrato. La termoestabilidad y la estabilidad del pH indicaron que la Cbm36-Lcc2 expresada en S. cerevisiae BJ1824 era más estable que en E. coli BL21 codón plus. La actividad lacasa de Cbm36-Lcc2 era entre dos y tres veces superior a la de Lcc2. Este estudio desarrolló la nueva idea de que la fusión de la nueva Cbm36 en Lcc2 podía mejorar la termoestabilidad de Lcc2 en su forma lacasa quimérica de Cbm36-Lcc2 en comparación con Lcc2.
Description
Keywords
Caliphruria tenera, Micropropagación, Alcaloides de las amarilidáceas, Adenocarcinoma de pulmón
Citation
Chacón, L. M. T., Leiva, H., Vahos, I. C. Z., Restrepo, D. C., & Osorio, E. (2023). Influence of plant growth regulators on in vitro biomass production and biosynthesis of cytotoxic Amaryllidaceae alkaloids in Caliphuria tenera Baker. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, 50, 102670.