Browsing by Author "Leiva, Hawer"

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    Influencia de los reguladores del crecimiento vegetal en la producción de biomasa in vitro y la biosíntesis de alcaloides citotóxicos de Amaryllidaceae en Caliphuria tenera Baker.
    (ScienceDirect, 2023-03-23) Trujillo-Chacón, Lina M.; Leiva, Hawer; Zapata-Vahos,Isabel Cristina; Castro-Restrepo, Dagoberto; Osorio, Edison
    Se sabe que los módulos de unión a carbohidratos (CBM) tienen el potencial de aumentar la unión de las enzimas activas en carbohidratos a los polisacáridos objetivo, por lo que el módulo catalítico puede entrar fácilmente en contacto con el sustrato a través del CBM. La lacasa es una de las enzimas más importantes que se utilizan en la etapa de deslignificación en la industria papelera. Esta enzima mejora la calidad del producto, el proceso industrial y las tecnologías respetuosas con el medio ambiente. En este estudio, hemos construido el gen de fusión que codifica un nuevo CBM36 a partir de la β-xilosa B (GbtXyl43B) de Geobacillus thermoleovorans IT- 08 y la lacasa (LCC2) de Pleurotus salmoneostramineus utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) superpuesta, y la hemos insertado en los vectores de expresión pET-32a y pYHM1 para Escherichia coli BL21 codón plus y Saccharomyces cerevisiae BJ1824, respectivamente. La proteína de fusión, Cbm36-Lcc2, se expresó con éxito tanto en E. coli como en S. cerevisiae, y se determinó que el pH y la temperatura óptimos eran 5,0 y 60 ◦C, y 6,0 y 60 ◦C, respectivamente, con 2,2′-azino-bis (3- etilbenzotiazolina-6-sulfonato; ABTS) como sustrato. La termoestabilidad y la estabilidad del pH indicaron que la Cbm36-Lcc2 expresada en S. cerevisiae BJ1824 era más estable que en E. coli BL21 codón plus. La actividad lacasa de Cbm36-Lcc2 era entre dos y tres veces superior a la de Lcc2. Este estudio desarrolló la nueva idea de que la fusión de la nueva Cbm36 en Lcc2 podía mejorar la termoestabilidad de Lcc2 en su forma lacasa quimérica de Cbm36-Lcc2 en comparación con Lcc2.
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    Localización histoquímica y potencial citotóxico de alcaloides en Phaedranassa lehmannii
    (MDPI, 2024-11-20) Trujillo-Chacón, L.ina M.; Leiva, Hawer; Rojas, José M.; Zapata-Vahos, Isabel C.; Castro, Dagoberto; Domínguez, María; Osorio, Edison
    Las plantas de la subfamilia Amaryllidoideae son una fuente de alcaloides únicos y bioactivos llamados alcaloides Amaryllidaceae. El estudio de su potencial anticancerígeno se ha intensificado en los últimos años. Este trabajo tiene como objetivo localizar y caracterizar el perfil de alcaloides citotóxicos biosintetizados y almacenados en diferentes tejidos de Phaedranassa lehmannii Regel utilizando diferentes métodos histoquímicos y análisis cromatográficos. El análisis histoquímico en los bulbos reveló la presencia de alcaloides en el borde basal de las hojas escamosas y la zona apical de las yemas. El análisis GC-MS indicó que los bulbos biosintetizan alcaloides tipo crinano (9,80 µg/g PS), galantamina (8,04 µg/g PS), licorina (7,38 µg/g PS) y narciclasina (3,75 µg/g PS). La raíz biosintetiza alcaloides, principalmente licorina (225,29 µg/g de peso seco) y galantamina (72,35 µg/g de peso seco). El total de alcaloides biosintetizados por la raíz (324,93 µg/g de peso seco) superó once veces la abundancia de los alcaloides identificados en los bulbos (28,97 µg/g de peso seco). Además, las fracciones totales de alcaloides mostraron un efecto citotóxico dosis-dependiente en las concentraciones evaluadas, con valores de CI50 de 11,76 ± 0,99 µg/mL y 2,59 ± 0,56 µg/mL contra células cancerosas de pulmón humano (A549), y de 8,00 ± 1,35 µg/mL y 18,74 ± 1,99 µg/mL contra células cancerosas gástricas (AGS). El presente estudio proporcionó evidencia para localizar y caracterizar los alcaloides de P. lehmannii cultivada en vivero como una especie con potencial para producir alcaloides antiproliferativos.